EM菌种可以扩繁的次数取决于多种因素，包括菌种的品质、扩繁条件以及扩繁目的等。虽然理论上EM菌可以无限繁殖，但在实际操作中，建议连续扩繁两次。

要自制菌种，需要遵循以下步骤：1.准备培养基：准备菌种培养所需的培养基。4.控制培养条件：根据菌种的要求，控制培养条件，包括温度、湿度、光照和氧气含量。

生物菌肥是一种由多种有益细菌组成的有机肥料，可促进植物生长和提高土壤肥力。其中，芽孢杆菌是常用的一种磷解菌，能够在不同的土壤环境中生长繁殖，对多种作物种类均有良好的促进作用。

分离菌种的两种方法是：传代分离法和涂片法。传代分离法的关键在于要保证每次传代时都从同一菌落中接种，以确保分离出单一的菌种。涂片法不能取代传代分离法，应根据需要选择合适的方法。

在羊肚菌种植的过程中，每亩土地的年收益可达2万元以上，甚至有的公司种植收益达到了数十万元。研究发现，羊肚菌具有增强免疫力、抗氧化、抗肿瘤、降血糖、降血脂等多种功效。

菌种的冷冻干燥保藏法是一种常用的微生物保存方法。经过冷冻干燥处理的菌种可长期保存，并保持较高的生物活性。在菌种的冷冻干燥保藏法中，缓冲剂和保护剂对维持菌体的稳定性非常重要。

1.短期保存短期保存是指在菌种保存条件下，保存时间一般不超过1个月，最多不超过3个月。常用的短期保存方法有以下几种：常温保存：在25~30℃下保存。

蘑菇制菌种方法的具体步骤包括原料筛选、菌丝接种、发酵、灭菌和干燥等环节。其中，灭菌和干燥对于蘑菇菌种的质量和储存寿命起着重要作用。